Réaction en chaîne de la polymérase (PCR) et test des MST

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) est une technique de laboratoire. Le test PCR a pour but de détecter de petites quantités d’ADN dans un échantillon, à l’aide d’un processus appelé amplification. Lors de l'amplification par PCR, l'ADN d'intérêt est copié à plusieurs reprises jusqu'à ce qu'il en ait assez pour l'analyse et la détection. Par exemple, la PCR peut être utilisée pour identifier de petites quantités d’ADN provenant d’organismes responsables de la gonorrhée ou de la chlamydia présents dans un échantillon d’urine..

Comment fonctionne le PCR?

La première étape de la PCR consiste à créer amorces. Ce sont de courtes séquences d'ADN qui correspondent aux extrémités de l'échantillon d'ADN que vous essayez de détecter. Ils permettent de rechercher, d’amplifier et de détecter un fragment d’ADN particulier. Ce morceau d'ADN peut être utilisé pour identifier un agent pathogène. Il peut également être utilisé pour détecter des gènes de résistance aux antibiotiques, par exemple..
Une fois que vous avez vos amorces, la prochaine étape de la PCR consiste à chauffer l’échantillon afin que l’ADN double brin se sépare en deux simples brins - c’est ce qu’on appelle dénaturation. Puis les amorcessont combinés avec l’ADN de l’échantillon. Après cela, un ADN polymérase est utilisé pour démarrer la réplication de l'ADN à l'emplacement de l'amorce. Enfin, l'ADN est chauffé pour séparer les brins une fois de plus. Avec cela, tout le processus de PCR commence à nouveau.
La quantité de segment d'ADN d'intérêt présente dans l'échantillon augmente de manière exponentielle à chaque cycle de PCR. Au premier cycle, une copie devient deux. Ensuite, deux copies deviennent quatre, puis huit, etc. Cette croissance exponentielle signifie que 20 à 40 cycles seulement sont généralement nécessaires pour déterminer si l'ADN en question est présent. (Si l'ADN est présent, 20 à 40 cycles suffisent également pour fournir un échantillon suffisant pour l'analyse).
Toutes les étapes d'une réaction en chaîne de la polymérase - dénaturation de l'ADN, application des amorces et allongement de l'ADN - se déroulent à des températures différentes. Cela signifie qu’après la mise en place du mélange initial, les étapes peuvent être contrôlées par un processus appelé thermocyclage. Le thermocyclage signifie que la température est maintenue aux niveaux nécessaires pendant le temps nécessaire à chaque étape. Ainsi, la PCR est un moyen efficace d’amplifier la quantité d’ADN cible. En fait, cela peut être accompli en une seule éprouvette avec peu d’intervention humaine..
La réaction en chaîne de la polymérase a révolutionné la technique biologique lorsqu'elle a été développée au début des années 1980. Le créateur de PCR, Kary Mullis, a remporté le prix Nobel de chimie pour ses travaux en 1993.

Pourquoi la PCR est-elle pertinente pour le test des MST?

Réaction en chaîne par polymérase et techniques connexes telles que réaction en chaîne de la ligase, revêtent une importance croissante pour le test des MST. En effet, ces techniques peuvent identifier directement de petites quantités d’ADN ou d’ARN viral dans des échantillons. Identifier le code génétique d'un agent pathogène ne nécessite pas que celui-ci soit vivant - contrairement à la culture bactérienne ou virale. Cela ne nécessite pas non plus que l’infection ait eu lieu il y a assez longtemps pour que les personnes développent une réaction détectable aux anticorps (façon dont les infections sont détectées par ELISA). Cela signifie que les techniques de PCR permettent parfois de détecter des maladies plus tôt que d’autres tests. Mieux encore, les MST peuvent être détectées sans avoir à se soucier de garder les échantillons en vie ou de les tester au bon moment.